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      流式細胞系統方案

      ②流式細胞儀系統

      日期:2015/04/28類型:流式細胞系統方案

      流式細胞儀是在激光技術、熒光標記技術、單克隆抗體技術、光電技術以及計算機技術等交叉融合的基礎上發展起來的一種先進的生物醫學測量儀器。 流式細胞儀一般配備三種激光,分別是488nm藍激光、638nm紅激光和405nm紫激光,共能檢測13 色熒光。目前在國內臨床市場上,主流配置以兩激光檢測 6色(2L6C)和兩激光檢測8色(2L8C)的儀器為主 目前 臨床型流式細胞儀 最高 可配置三激光檢測13色(3L13C)。

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      常見的臨床型流式細胞儀


      流式細胞儀的特點

      ①單細胞分析:流式細胞分析的對象是單個細胞或其他生物顆粒,臨床檢驗中常見的外周血樣本 經制備 染色后可直接上機檢測;

      ②多參數分析:流式細胞分析 儀 可以獲得細胞或其他生物顆粒的大小和形態復雜程度等物理參數,亦可以通過熒光染料標記技術對細胞的核酸含量、抗原表達、酶活性以及細胞膜流動性等進行檢測;

      ③高通量檢測:流式細胞儀每秒鐘可以對上萬的細胞進行分析,最終樣本中被檢測的細胞數量可達數百萬個,因此流式細胞術對細胞特性的分析和計數更加準確;

      ④定性、定量分析:流式細胞分析可以熒光強度判斷靶抗原是否表達或表達量的高低。


      流式細胞儀的工作原理

      待測樣本經制備而成單 細胞懸液,在流式細胞儀精細的液流和壓力控制下,受到鞘液的包裹和約束,細胞排成單列 高速由流動室( Flow Cell )噴嘴噴出,形成細胞液柱。當液柱通過光學檢測區,液柱中的細胞在入射的激光束照射下產生前向散射光(Forward Scatter FSC )和側向散射光 Side Scatter SSC ),它們分別反映細胞大小和顆粒度,根據這些特性可以將細胞分類。經一種或幾種特殊熒光標記的樣本,在激光束的激發下所產生的特定熒光,可被光學系統檢測并輸送到計算機進行分析,得到細胞相應的各種特性。

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      流式細胞儀工作原理 結構 圖

      (圖片來源于網絡)

      流式細胞儀的主要結構

      ①流動室和液流系統:

      流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成 。設計和制作均很精細,是液流系統的心臟。樣品管貯放樣品,單個細胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出;鞘液由鞘液管從四周流向噴孔,包圍在樣品外周后從噴嘴射出。由于鞘液的作用,被檢測細胞被限制在液流的軸線上 ,以確保單個細胞或顆粒通過照射區。 流動室上裝有壓電晶體,受到振蕩信號可發生振動。

      ②激光源和光學系統:

      當液柱通過光學檢測區,液柱中的細胞在入射的激光束照射下產生前向散射光( Forward Scatter FSC )和側向散射光( Side ScatterSSC ),它們分別反映細胞大小和顆粒度 。 而 經特異熒光染色的細胞需要合適的光源照射激發才能發出熒光供收集檢測。

      ③光電管和檢測系統:

      經熒光染色的細胞受合適的光激發后所產生的熒光會通過光電轉換器 轉變成電信號,經過放大器放大后輸入分析儀器進行測量。

      ④計算機和分析系統:

      經放大后的電信號被送往計算機分析器。多道的道數是 和電信號的脈沖高度相對應的,也是和光信號的強弱相關的。通過相適應的軟件即可對數據進行加工分析,實現 分析結果的輸出。

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      熒光信號檢測示意圖


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