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      走近流式世界

      婦產科流式項目 參考指南

      日期:2018/11/21類型:走近流式世界
      淋巴細胞亞群 流式檢測在臨床中的應用

      機體免疫是由機體的免疫器官、免疫細胞及其產物與體液內分泌系統互為協調,維持機體免疫生理平衡的防御性體系。其中免疫細胞是這個體系的中心,淋巴細胞是執行免疫功能的主要細胞,主要分為T、B、NK三大類,其中T細胞主導細胞免疫,表面標記為CD3;B細胞主導體液免疫,表面標記為CD19,分布于B細胞發育的各個階段;NK細胞稱自然殺傷細胞,保護機體的第一道屏障,特異性標志為CD16、CD56。

      檢測各類細胞和細胞亞群的數量、比例及細胞表面標志的變化,可以了解機體所處的免疫功能狀態,對疾病的診斷與鑒別、療效評估、預后判斷等十分重要,對機體亞健康狀態的診斷及發生相關疾病的評估,也具有重要意義。

       

      淋巴亞群檢測項目的臨床意義及正常參考值范圍

      項目名稱

      檢測指標

      參考值(%)

      絕對計數(個/μL

      淋巴亞群(T,B,NK

      CD3,

      CD3CD4,

      CD3CD8,

      CD19,

      CD56,

      CD4/CD8

      CD3+

      72±7

      711-2351

      CD3+ CD4+

      43±9

      368-1632

      CD3+ CD8+

      30±9

      201-931

      CD4/ CD8

      1.42±0.89

      0.63-3.39

      CD3- CD16+56+

      14.91±4.87

      63-1013

      CD3-CD19

      11.56±2.54

      74-534

      活化淋巴細胞免疫表型/幼稚型和記憶型T淋巴細胞

      CD3HLA-DR,

      CD3CD25,CD3CD45RA,

      CD3CD45RO

      CD3+HLA-DR+

      3.1±1.3


      CD3+CD25+

      15.9±3.7


      CD3+CD45RO+

      3.3±1.55


      CD3+CD45RA+

      20.51±3.64


      Th亞群

      IFN-γ/IL-4/CD4/CD3

      Th1CD3+CD4+IFN-γ+

      18.7±5.03


      Th2CD3+CD4+IL-4+

      2.99±0.72


      中性粒細胞指數

      CD64

      中性粒CD64/淋巴細胞

      CD64平均熒光強度≤1


       

      一、      建議檢測指標

      1T淋巴細胞亞群

      T細胞:CD3+

      輔助誘導型T細胞:CD3+CD4+

      抑制殺傷型T細胞:CD3+CD8+

      T4/T8CD4/CD8

      2B細胞亞群:CD19+

      3NK自然殺傷性細胞:CD3+CD56+

      4)活化指標:CD45RO+CD45RA+;CD3+HLA-DR+;CD8+CD38+

      5Th1Th2細胞:CD4+IFN-γ+,CD4+IL-4+

      6)中性粒細胞CD64抗原檢測

      正常:中性粒細胞CD64指數(中性粒細胞CD64平均熒光強度/淋巴細胞CD64平均熒光強度)≤1;

      感染或組織損傷:中性粒細胞CD64指數>1。

       

      一、      臨床意義

      1、不孕、自然流產、習慣性自然流產與不良妊娠

      自然流產原因不明,與遺傳、解剖、內分泌及免疫異常有關。

      不孕和反復性流產的女性外周血中NK細胞水平常會升高,而NK細胞可被失敗妊娠或退化的受精卵激活,增多時會將胎兒細胞誤認為非正常細胞,從而殺傷胎兒細胞,當這類細胞比率大于18%時往往預示著較差的妊娠結局。

      習慣性自然流產與免疫系統異常有關。輔助性T淋巴細胞分化成兩個亞群,Th1Th2,分泌不同的細胞因子。Th1細胞分泌IL-2IFN-γ,通過細胞介導的免疫反應,清除胞內抗原;Th2細胞分泌IL-4、5、10,參與體液免疫和過敏反應。正常懷孕的婦女細胞因子“偏向”Th2。

      不良妊娠結局可能是和感染有密切關系的。病原體可包括弓形蟲、巨細胞病毒、單純皰疹病毒、風疹病毒、細菌、螺旋體、支原體、衣原體等??梢酝ㄟ^淋巴細胞亞群檢驗進行診斷。

      2、孕程檢測和治療預后判斷

      T淋巴細胞和B淋巴細胞

      --分泌期子宮內膜,CD8+T細胞比例降低,CD4+/CD8+比值增高。B細胞比例顯著增高

      --習慣性自然流產這經治療后,檢測CD8+T細胞和B細胞數目和CD4/CD8比值,恢復正常后,隨后成功懷孕

      --可作為治療的預測指標

      --試劑:淋巴細胞亞群分析試劑,根據儀器配置選擇

      NK細胞

      --在懷孕并發的子癇和流產患者,發現外周邊血液NK細胞數目增多,子宮內膜浸潤的NK細胞增多,并且表達活化標志

      --NK細胞的毒性可作為可能發生自燃流產的預測指標

      --檢測標志:CD3/CD56/CD69

      B細胞

      --體液免疫異常

      --檢測標志:CD19/CD5

      胞內細胞因子

      --正常懷孕的婦女,Th2細胞因子占優勢;習慣性自然流產的婦女,Th1細胞因子占優勢。在不孕的婦女,TNF-α分泌增多。IL-10分泌與正常婦女比減少。

      -TNF-α可能通過誘導細胞凋亡的方式,抑制滋養層的生長

      --IL-10通過抑制IFN-  BTNF-  BIL-1的產生,選擇性抑制Th1介導的細胞免疫。習慣性自然流產免疫治療后判斷

      --流式交叉配型實驗,陽性結果懷孕率高。比微量淋巴細胞毒實驗靈敏度高,出結果快??勺鳛槌R帣z測。

      --母親的血清與父親的T淋巴細胞反應,在流式細胞儀上檢測。

      --經免疫治療后,母體細胞因子分泌發生改變。


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